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支原体感染的观察与检测：相差显微镜与荧光显微镜的应用

支原体是一种常见的病原体，可引起各种疾病，其中最常见的是肺炎。支原体可独立存活，不侵入机体组织与血液，直径0.2～0.3耻尘，结构简单，球形，没有细胞壁，只有叁层结构的细胞膜，故具有较大的可变性，因此支原体感染的检测对于诊断和治疗支原体引起的疾病至关重要。

支原体主要黏附在细胞膜上生存，没有细胞壁，通常呈圆形或椭圆形，一般呈末端尖锐、表面有许多小突起的形态特征，可以使用相差显微镜或者荧光显微镜观察检测支原体，有助于诊断和治疗支原体引起的疾病。（注意事项：支原体与细胞破碎后溢出的细胞内容物如线粒体等颇相似，应细加区别。）

1.相差显微镜检测法

相差显微镜能够观察活细胞和未染色的标本，可以观察到支原体呈暗色微小颗粒，有类似布朗运动的表现，在细胞表面或细胞之间游离或成群分布的形态和排列方式。

2.荧光显微镜检测法

荧光显微镜观察需要使用特殊的荧光染料或抗体对支原体进行标记，根据荧光反应判断是否感染。一般来说，支原体感染的细胞在荧光显微镜下会呈现出绿色或红色荧光，这取决于所使用的荧光染料和抗体。

在呼吸道九联检查中也包含支原体肺炎检测，在荧光显微镜下，如果观察到红色细胞外围出现明亮的绿色荧光反应，且形态为明显的细胞膜或者胞浆，则可以判定为阳性，这些绿色的荧光信号标记的就是肺炎支原体。这是因为肺炎支原体在受到特定荧光染料的标记后，会发出绿色荧光。

相反，如果红色细胞周围无荧光或少量绿色荧光，且荧光较弱，则判定为阴性，这意味着样本中未检测到肺炎支原体。

适用观察检测支原体，提供明场、暗场、相衬的通用聚光镜，可选配落射式垂直荧光照明器，光源采用 LED 光源，便于得到高分辨率、高对比度的图像。

荧光显微镜观察诊断支原体肺炎适合于各种临床情况，尤其适用于首诊检测阴性，但复诊仍然怀疑肺炎支原体感染的情况。由于其操作简便、结果直观，因此成为一种简单、直观、容易实现的观察和诊断方式。